1、原理：
蔬菜的植物色素包括叶绿素、叶黄素及胡萝卜素等，它们能被丙酮、石油醚溶液提取出来。将样品提取液进行纸上层析，由于胡萝卜素极性最小，故被石油醚洗走速度最快，从而可将胡萝卜素与其它色素分开，然后将胡萝卜素层析带洗脱进行比色定量。
2、试剂：
(1)石油醚（沸程60～90℃．，分析纯)
(2)丙酮（分析纯)
(3)丙酮-石油醚溶液(3：7)：以三分丙酮、七份石油醚振摇混合。
(4)无水硫酸钠（分析纯)
(5)5%硫酸钠溶液
(6)}胡萝卜素标准溶液：精确称取纯β-胡萝卜等50mg，溶于数毫升氯仿中，然后以石油醚稀释至100ml，其浓度为0.50mg/ml。将此溶液稀释10倍，即得50μg／ml的胡萝卜素标准应用液。冷暗处保存。
(7)层析：
图3 点样示意图
图4 层析装置
a、点样：准确吸取待检液0.1—0.2ml(医学三基随胡萝卜素含量而定)在滤纸下端基线上A、B两点之间或C、D两点之间迅速来回进行带状点样（见图3)-次点完。每个样品点两带作为平行样。
b、展开:将点好样的滤纸卷成圆筒状，固定两边，放入事先饱和了石油醚蒸气的层析缸内，进行上行展开（见图4)（注意：纸纹方向与展开方向一致；缸内石油醚深度约lcm即可，样斑不能直接接触石油醚)。
(9)洗脱及比色：待胡萝卜素与其它色素完全分离后，取出滤纸，将胡萝卜素层析带剪下，立即放入盛有5ml石油醚的试管中，用力振摇，使之完全洗入溶液中。以石油醚为空白，立即在波长450nm处比色。
(10)标准曲线的绘制：取50μg/ml的胡萝卜素应用液2.00ml放入100ml具塞锥形瓶内，以下操作步骤与样品分析(2)～(9)项同，但点样体积分别为0.04、0.08、、0.12、0.16、0.20相当于含胡萝卜素2、4、6、8、10μg，比色后，绘制曲线。
5、计算：
样品胡萝卜素含量
式中：A-测定管内样品相当于标准管的微克数．
V1-点样毫升数；
V2-加入瓷蒸发皿内的石油醚毫医学全.在线www.med126.com升数
W-样品克数
6、注意事项：
(1)捣碎时加水不能太多，否则不仅提取困难，还不易得均匀样品。
(2)如无捣碎机，可用乳钵加河沙研磨河沙处理方法。
(3)滤纸从层析缸取出后，需立即剪下胡萝卜素层析带进行洗脱，以免氧化破坏使结果偏低。
