第三节 隐孢子虫
隐孢子虫（Cryptosporidium Tyzzer, 1907)为体积微小的球虫类寄生虫。广泛存在多种脊椎动物体内，寄生于人和大多数哺乳动物的主要为微小隐孢子虫（C. parvum)，由微小隐孢子虫引起的疾病称隐www.med126.com孢子虫病（cryptosporidiosis)，是一种以腹泻为主要临床表现的人畜共患性原虫病。
【形态】 卵囊呈圆形或椭圆形，直径4~6μm，成熟卵囊内含4个裸露的子孢子和残留体（residual body)。子孢子呈月牙形，残留体由颗粒状物和一空泡组成（图11-8 )。在改良抗酸染色标本中，卵囊为玫瑰红色，背景为蓝绿色，对比性很强，囊内子孢子排列不规则，形态多样，残留体为暗黑（棕)色颗粒状。
图11-8 隐孢子卵囊（5版94页 图8-8) |
【生活史】 隐孢子虫完成整个生活史只需一个宿主。生活史简单，可分为裂体增殖，配子生殖和孢子生殖三个阶段。虫体在宿主体内的发育时期称为内生阶段。随宿主粪便排出的成熟卵囊为感染阶段。
人和许多动物都是本虫的易感宿主，当宿主吞食成熟卵囊后，在消化液的作用下，子孢子在小肠脱囊而出，先附着于肠上皮细胞，再侵入其中，在被侵入的胞膜下与胞质之间形成纳虫空泡，虫体在空泡内开始无性繁殖，先发育为滋养体，经3次核分裂发育为Ⅰ型裂殖体。成熟的Ⅰ型裂殖体含有8个裂殖子。裂殖子被释出后侵入其它上皮细胞，发育为第二代滋养体。第二代滋养体经2次核分裂发育为Ⅱ型裂殖体。成熟的Ⅱ型裂殖体含4个裂殖子。此裂殖子释出后侵入肠上皮发育为雌、雄配子体，进入有性生殖阶段，雌配子体进一步发育为雌配子，雄配子体产生16个雄配子，雌雄配子结合形成合子，进入孢子生殖阶段。合子发育为卵囊。卵囊有薄壁和厚壁两种类型，薄壁卵囊约占20%，仅有一层单位膜，其子孢子逸出后直接侵入宿主肠上皮细胞，继续无性繁殖，形成宿主自身体内重复感染；厚壁卵囊约占80%，在宿主细胞内或肠腔内孢子化（形成子孢子)。孢子化的卵囊随宿主粪便排出体外，即具感染性（图11-9)。完成生活史约需5~11天。
图11-9 隐孢子虫生活史（见光盘) |
【致病】 本虫主要寄生于小肠上皮细胞的刷状缘纳虫空泡内。空肠近端是虫体寄生数量最多的部位，严重者可扩散到整个消化道。亦可寄生在呼吸道、肺脏、扁桃体、胰腺、胆囊和胆管等器官。
寄生于肠粘膜的虫体，使粘膜表面出现凹陷，或呈火山口状。寄生数量多时，可导致广泛的肠上皮细胞的绒毛萎缩、变短、变粗、或融合、移位和脱落，上皮细胞老化和脱落速度加快。固有层多形核白细胞、淋巴细胞和浆细胞浸润。此外，艾滋病患者并发隐孢子虫性胆囊炎、胆管炎时，除呈急性炎症改变外，尚可引起坏疽样坏死。
隐孢子虫的致病机理尚未完全澄清，很可能与多种因素有关。小肠粘膜的广泛受损，肠粘膜表面积减少，破坏了肠道吸收功能，特别是脂肪和糖类吸收功能严重障碍，导致患者严重持久的腹泻，大量水及电解质从肠道丢失。此外，由于隐孢子虫感染缩小了肠粘膜表面积，使得多种粘膜酶明显减少，例如乳糖酶，这也是引起腹泻的原因之一。
临床症状的严重程度与病程长短亦取决于宿主的免疫功能状况。免疫功能正常宿主的症状一般较轻，潜伏期一般为3~8天，急性起病，腹泻为主要症状，大便呈水样或糊状，一般无脓血，日排便2~20余次。严重感染的幼儿可出现喷射性水样便，量多。常伴有痉挛性腹痛、腹胀、恶心、呕吐、食欲减退或厌食、口渴和发热。病程多为自限性，持续7~14天，但症状消失后数周，粪便中仍可带有卵囊。少数病人迁延1~2个月或转为慢性反复发作。免疫缺陷宿主的症状重，常为持续性霍乱样水泻，每日腹泻数次至数十次，量多，达数升至数十升。常伴剧烈腹痛，水、电解质紊乱和酸中毒。病程可迁延数月至1年。病人常并发肠外器官隐孢子虫病，如呼吸道和胆道感染，使得病情更为严重医学检验网复杂。隐孢子虫感染常为AIDS病人并发腹泻而死亡的原因。
【实验诊断】
1.病原学诊断 粪便（水样或糊状便为好)直接涂片染色，检出卵囊即可确诊。有时呕吐物和痰也可作为受检标本。检查方法有：
（1)金胺—酚染色法：新鲜或甲醛固定后的标本均可用此法，染色后在荧光显微镜下观察。卵囊圆形呈明亮乳白—黄绿色荧光。低倍镜下为圆形小亮点，周边光滑，虫体数量多时可遍布视野，犹如夜空中繁星。高倍镜下卵囊壁薄，中央淡染，似环状。本法简便、敏感，适用于批量标本的过筛检查。
（2)改良抗酸染色法：染色后背景为蓝绿色，卵囊呈玫瑰色，圆形或椭圆形，囊壁薄，内部可见1~4个梭形或月牙形子孢子，有时尚可见棕色块状的残留体。但粪便标本中多存在红色抗酸颗粒，形同卵囊，难以鉴别。
（3)金胺酚—改良抗酸染色法：先用金胺—酚染色，再用改良抗酸染色复染，用光学显微镜检查，卵囊形态同抗酸染色所示，但非特异性颗粒呈蓝黑色，颜色与卵囊不同，有利于查找卵囊，优化了改良抗酸染色法，提高了检出率。
（4)基因检测：采用PCR和DNA探针技术检测隐孢子虫特异DNA，具有特异性强、敏感性高的特点。在PCR中使用相应的引物，可扩增出隐孢子虫DNA特异的452bp片段，其敏感性可达0.1pg水平。
2.免疫学诊断 隐孢子虫病的免疫学诊断近年发展较快，具有弥补粪检不足的优点。
（1)粪便标本的免疫诊断：均需采用与卵囊具高亲和力的单克隆抗体。在IFAT的检测中卵囊在荧光显微镜下呈明亮黄绿色荧光，特异性高、敏感性好。适用于对轻度感染者的诊断和流行病学调查。采用ELISA技术检测粪便中的卵囊抗原，敏感性、特异性均好，勿需显微镜。流式细胞计数法可用于卵囊计数，考核疗效。
（2)血清标本的免疫诊断：常采用IFAT、ELISA和酶联免疫印迹试验（ELIB)，特异性、敏感性均较高，可用于隐孢子虫病的辅助诊断和流行病学调查。
【流行】
1．分布 隐孢子虫病呈世界性分布。迄今已有74个国家，至少300个地区有报道。各地感染率高低不一，一般发达国家或地区感染率低于发展中国家或地区。在腹泻患者中，欧洲、北美洲隐孢子虫检出率为0.6%~20%，亚洲、大洋州、非洲和中南美洲为3%~32%。很多报道认为，隐孢子虫的发病率与当地的空肠弯曲菌、沙门氏菌、志贺氏菌、致病性大肠杆菌和蓝氏贾第鞭毛虫相近，在寄生虫性腹泻中占首位。同性恋并发艾滋病患者近半数感染隐孢子虫。在与病人、病牛接触的人群和在幼儿集中的单位，隐孢子虫腹泻暴发流行时有发生。
国内韩范于1987年在南京首先发现了人体隐孢子虫病病例。随后安徽、内蒙、福建等19个省区也相继报道了一些病例，截止到1998年，据不完全统计已超过千例。在腹泻患者中的检出率为0.9%~13.3%。
隐孢子虫病流行具备下列特点：2岁以下的婴幼儿发病率较高，男女间无明显差异；温暖潮湿季节发病率较高；农村多于城市，沿海港口多于内地；经济落后、卫生状况差的地区多于发达地区；畜牧地区多于非牧区；旅游者多于非旅游者。
2．流行环节
（1)传染源 ：感染了隐孢子虫的人和动物都是传染源，已知40多种动物，包括哺乳类动物，如牛、羊、犬、猫等均可作为该虫的保虫宿主。隐孢子虫病人和带虫者的粪便和呕吐物中均含有卵囊，都是重要的传染源。
（2)传播途径：本病为人畜共患性疾病，人与动物可以相互传播，但人际的相互接触是人体隐孢子虫病最重要的传播途径。传播可发生于直接或间接与粪接触，食用含隐孢子虫卵囊污染的食物或水是主要传播方式。近年来，英、美等国均有水源污染引起暴发流行的报道，如只有6万人口的佐治亚洲，有13，000人发生了胃肠炎，其中39%粪检卵囊阳性。旅游者亦常通过饮用污染的水源而造成暴发流行。此外，同性恋者之间的肛交也可导致本虫传播，痰中有卵囊者可通过飞沫传播。
3. 易感人群 人对隐孢子虫普遍易感。婴幼儿、艾滋病患者、接受免疫抑制剂治疗的病人以及免疫功能低下者更易感染。在欧美、大约11%～21%的艾滋病患者腹泻便中发现该虫卵囊，而在非洲等发展中国家可达12%～48%。
【防治】 应防止病人、病畜及带虫者的粪便污染食物和饮水，注意粪便管理和个人卫生，保护免疫功能缺陷或低下的人，增强其免疫力，避免与病人病畜接触。凡接触病人病畜者，应及时洗手消毒；因卵囊的抵抗力强，病人用过的便盆等必须在3%漂白粉中浸泡30分钟后，才能予以清洗。10%福尔马林、5%氨水可灭活卵囊。 此外， 65~70℃加热30分钟可灭活卵囊，因此应提倡喝开水。
隐孢子虫病至今尚无特效治疗药。一般认为对免疫功能正常患者，应用对症和支持疗法，纠正水、电解质紊乱可取得良好的效果。对免疫功能受损者，恢复其免疫功能、及时停用免疫抑制剂药物则是主要措施，否则治疗大多无效。国外目前有用螺旋霉素、巴龙霉素治疗者。用人工高免疫牛初乳(hyperimmune bovine colostrum, HBC)、牛乳球蛋白、牛转移因子治疗也获得疗效。国内用大蒜素治疗，有一定效果。
