银杏叶提取物－总黄酮醇苷的测定－高效液相色谱法

本方法采用高效液相色谱法测定银杏叶提取物中总黄酮醇苷的含量。

本方法适用于银杏叶经加工制成的提取物。

本品加甲醇-25%盐酸溶液（4：1)加热回流，冷却，用甲醇稀释，摇匀，滤过，续滤液进入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器，于波长360nm处检测槲皮素的吸收值，计算出其含量。

1. 甲醇

2. 25%盐酸溶液

3. 0.4%磷酸溶液

1 仪器

1.1 高效液相色谱仪

1.2 色谱柱

十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，理论塔板数按槲皮素峰计算应不低于2500。

1.3 紫外吸收检测器

2色谱条件

2.1流动相：甲醇 0.4%磷酸溶液＝50 50

2.2检测波长：360nm

2.3柱温：室温

1. 称取供试品

精密称定本品35mg，为供试品。

2. 对照品溶液的制备

分别精密称取槲皮素对照品、山奈素对照品、异鼠李素对照品，加甲醇制成每1mL分别含30mg、30mg、20mg的混合溶液；或精密称取已标示槲皮素、山奈素、异鼠李素含量的银杏叶对照提取物35mg，照供试品溶液的制备方法，同法制成对照提取物溶液。

3. 供试品溶液的制备

取本品约35mg，精密称定，加甲醇-25%盐酸溶液（4：1)的混合溶液25mL，置水浴中加热回流30分钟，迅速冷却至室温，转移至50 mL量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，续滤液作为供试品溶液。

分别精密吸取对照品溶液（或对照提取物溶液)和供试品溶液各10mL，注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器于波长360nm处测定槲皮素、山奈素和异鼠李素的峰面积，计算出其含量。

中华人民共和国药典，国家药典委员会编，化学工业出版社，2005版，一部，p281。