乙肝宁颗粒－黄芪甲苷的测定－高效液相色谱法

本方法采用高效液相色谱法测定乙肝宁颗粒中黄芪甲苷的含量。

本方法适用于中成药乙肝宁颗粒。

本品加水溶解，用水饱和正丁醇提取，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇溶解，摇匀，滤过，续滤液进入高效液相色谱仪进行色谱分离，用蒸发光散射检测器检测，计算出其含量。

1. 甲醇

2. 正丁醇

3. 氨试液

1 仪器

1.1 高效液相色谱仪

1.2 色谱柱

十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，理论塔板数按黄芪甲苷峰计算应不低于2000。

1.3 蒸发光散射检测器

2色谱条件

2.1流动相：甲醇 水 ＝75 25

2.2柱温：40℃

1. 称取供试品

精密称定本品5g或1g（无蔗糖)，为供试品。

2. 对照品溶液的制备

精密称取黄芪甲苷对照品适量，加甲醇制成每1mL含60mg的溶液。

3. 供试品溶液的制备

取装量差异项下的本品，研细，取约5g或1g（无蔗糖)，精密称定，加水20mL使溶解，用以水饱和的正丁醇振摇提取4次，每次20mL，合并正丁醇液，用氨试液20mL分两次洗涤，取正丁醇液，用以正丁醇饱和的水20mL分两次洗涤，取正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇适量使溶解，移至5mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，续滤液作为供试品溶液。

分别精密吸取对照品溶液10mL、30mL和供试品溶液20mL，注入高效液相色谱仪，用蒸发光散射检测器测定黄芪甲苷（C₄₁H₆₈O₁₄)，计算出其含量。

中华人民共和国药典，国家药典委员会编，化学工业出版社，2005版，一部，p290。