方法名称: |
穿心莲片-脱水穿心莲内酯的测定-高效液相色谱法 |
应用范围: |
本方法采用高效液相色谱法测定穿心莲片中脱水穿心莲内酯的含量。 本方法适用于中成药穿心莲片。 |
方法原理: |
本品加甲醇超声提取,过柱洗脱,摇匀,进入高效液相色谱仪进行色谱分离,用紫外吸收检测器,于波长254nm处检测脱水穿心莲内酯的吸收值,计算出其含量。 |
试剂: |
甲醇 |
仪器设备: |
1 仪器 1.1 高效液相色谱仪 1.2 色谱柱 十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,理论塔板数按脱水穿心莲内酯峰计算应不低于2000。 1.3 紫外吸收检测器 2色谱条件 2.1流动相:甲醇 水=60 40 2.2检测波长:254nm 2.3柱温:室温 |
试样制备: |
1. 称取供试品 取本品20片(小片)或10片(大片),除去包衣,精密称定,研细,取0.5g,精密称定,为供试品。 2. 对照品溶液的制备 精密称取脱水穿心莲内酯对照品适量,加甲醇制成每1mL含0.1mg的溶液。 3. 供试品溶液的制备 供试品,置具塞锥形瓶中,精密加入甲醇25mL,密塞,称定重量,浸泡1小时,超声处理(功率250W,频率33kHz)30分钟,放冷,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,精密量取续滤液10mL(剩余的续滤液备用),加在中性氧化铝柱(200~300目,5g,内径1.5cm)上,用甲醇20mL洗脱,收集洗脱液,置50mL量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,作为供试品溶液。 |
操作步骤: |
分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10mL,注入高效液相色谱仪,用紫外吸收检测器于波长254nm处测定脱水穿心莲内酯(C20H28O4)的峰面积,计算出其含量。 |
参考文献: |
中华人民共和国药典,国家药典委员会编,化学工业出版社,2005版,一部,p549。 |