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您现在的位置: 医学全在线 >> 药学理论 >> 中药及天然药物质量控制研究方法 >> 正文:木通-皂苷类成分的含量测定方法-RP-HPLC中药质量控制方法/操作步骤
    

木通-皂苷类成分的含量测定方法-RP-HPLC

  
方法名称:
  木通-皂苷类成分的含量测定-RP-HPLC
应用范围:
  用于木通中皂苷类成分的含量测定
方法原理:
 本品细粉加70 %甲醇超声提取、水饱和乙酸乙酯萃取,经液相色谱分离,在203 nm处测定峰面积,外标法计算含量
仪器设备及实验条件:
 

仪器    Hewlett-Packard 1100单泵高效液相色谱仪

试剂    Saponin PJ1mutongsaponin C对照品由本实验室分离纯化并鉴定结构,纯度>98 %

色谱条件    色谱柱:Phenomenex Luna C18 (4.6 mm×250 mm,5 μm);流动相:甲醇-乙腈-水-磷酸(20∶20∶60∶0.1);流速:1.0 mL/min;柱温:35 ℃;检测波长:203 nm
试样制备:
 

对照品溶液制备    分别精密称取saponin PJ1mutongsaponin C对照品2.01.7 mg置于10 mL的量瓶中,甲醇溶解并稀释至刻度得0.200.17 g/L的混合对照品溶液,即得。

供试品溶液制备    取药材粉末(60目)约1.0 g,精密称定,置具塞三角瓶中,精密加入体积分数为70 %的甲醇50 mL,精密称定,超声提取30 min,补足重量,摇匀,滤过。精密量取续滤液30 mL,减压蒸干溶剂,残渣以10 mL水分次洗涤,合并各次洗涤液并转入分液漏斗中,以水饱和乙酸乙酯萃取3次,每次10 mL,弃去乙酸乙酯液,水层用水饱和正丁醇萃取5次,每次10 mL,合并萃取液,置蒸发皿中蒸干,残渣以体积分数为70 %甲醇溶解、洗涤并定容于5.0 mL量瓶中,用0.45 μm微孔滤膜过滤,即得。
操作步骤:
  分别精密吸取saponin PJ1和mutongsaponin C对照液以及木通供试品溶液各20 μL,注入液相色谱仪,按上述色谱条件测定峰面积。以外标法计算saponin PJ1和mutongsaponin C含量。
附件:
  点击下载 (解压密码:www.med126.com)
备注:
 
参考文献:
  高慧敏,王智民,付雪涛等. RP-HPLC测定木通药材中皂苷类成分的含量.中国药学杂志. 2007,42(1):20~23
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