方法名称： |
虫草菌粉--核苷类成分的含量测定--HPLC法 |
应用范围： |
测定虫草菌粉中核苷类成分的含量 |
方法原理： |
样品加甲醇超声提取，经液相色谱仪分离，在260nm测定峰面积，标准曲线法测定各核苷类成分含量。 |
仪器设备及实验条件： |
仪器设备 Agilent 1100 高效液相色谱仪(四元泵、自动进样器、柱温箱、二极管阵列检测器)； |
试样制备： |
标准曲线的制备 对照品溶液的制备 ①精密称取尿嘧啶对照品4. 52 mg置10mL量瓶中，加入少量甲醇溶解，并加甲醇稀释至刻度。配成0. 452mg·mL-1的溶液。 ②精密称取尿苷对照品3.36mg 置10mL量瓶中，加入少量甲醇溶解，并加甲醇稀释至刻度。配成0. 336mg·mL-1的溶液。 ③精密称取腺嘌呤对照品2.04mg 置10mL量瓶中，加入少量甲醇溶解，并加甲醇稀释至刻度。配成0. 204mg·mL-1的溶液。 ④精密称取腺苷对照品2.17mg置10mL量瓶中，加入少量甲醇溶解，并加甲醇稀释至刻度。配成0. 217mg·mL-1的溶液。 分别取对照品溶液各1.0mL混合均匀，用0.45μm的微孔滤膜滤过,取续滤液0.1，0.5，1.0，1.5，2.0和4.0μL注入高效液相色谱仪以色谱峰峰面积对进样量回归，即得。 |
操作步骤： |
依供试品溶液的制备方法，制得虫草粉供试品溶液，取10μL注入高效液相色谱仪进行分析，计算得各核苷含量。 |
附件： |
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备注： |
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参考文献： |
袁永生,张莉,许效枫等.反相高效液相法测定虫草菌粉中核苷类成分的含量.中国药学杂志.2002,37(10):776-778 |
