方法名称: |
辐花肋柱花—苦龙苷—RP-HPLC |
应用范围: |
本方法适用于辐花肋柱花中苦龙苷含量的测定 |
方法原理: |
本品粉末加甲醇超声提取,经液相色谱分离,在254 nm处测定峰面积,外标法计算含量。
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仪器设备及实验条件: |
仪器 Agilent1100高效液相色谱仪(配置手动进样器、在线脱气机、高压二元梯度泵、恒温柱温箱、DAD检测器、Agilent1100色谱工作站) 色谱条件 色谱柱:Kromasil-C18(250 mm×4.6 mm,5 μm);流动相:甲醇和水(含0.04 %磷酸),其比例为52∶48(体积比);流速:0.8 mL/min;检测波长:254 nm;柱温:30 ℃ |
试样制备: |
对照品溶液制备 精确称取苦龙苷对照品2.2 mg溶于1 mL甲醇中,配制成2.2 mg/mL的储备液,使用时稀释成所需浓度。 供试品溶液制备 分别精确称取粉碎至80目的样品0.5 g,加入甲醇10 mL,超声提取0.5 h,过滤,滤渣重复提取1次,合并滤液,定容至25 mL,过0.45 μm滤膜,取续滤液,即得。 |
操作步骤: |
分别精密吸取苦龙苷对照液以及辐花肋柱花供试品溶液适量,注入液相色谱仪,按上述色谱条件测定峰面积。以外标法计算苦龙苷含量。 |
附件: |
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备注: |
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参考文献: |
俞青芬,林鹏程.反相高效液相色谱法测定辐花肋柱花中苦龙苷含量的研究.安徽农业科学. 2007. 35(4): 967~968 |