方法名称： |
草乌类药用植物--活性成分含量测定—HPLC法 |
应用范围： |
对草乌类植物进行质量与资源评价 |
方法原理： |
样品以乙醚提取，液相色谱分离，在240nm处测定峰面积，外标法计算含量。 |
仪器设备及实验条件： |
仪器设备 Shimadzu LC-10A高效液相色谱仪(日本，包括LC-0ATvp溶剂输送泵，SCL-10Avp系统控制器，SPD-10Avp/10AVvp紫外-可见检测器，CTO-10ASvp柱温箱，DGU-12A在线真空脱气机，Class-up工作站；AS3120A Ultrasonic Cleaner；KL-009袖珍数显笔式酸度计。 色谱条件 色谱柱：Phenomenex ODS 柱(4.6mm ×250mm,5μm)；流动相：乙腈-醋酸铵缓冲溶液(pH10.5)(54∶46)；流速：1.0mL/min；检测波长：240nm；柱温为30℃。 |
试样制备： |
对照品溶液的制备 精密称取对照品适量，用乙腈配制成中乌头碱0.07g/L、乌头碱0.034g/L、次乌头碱0.62g/L的混合标准溶液。 供试样品溶液的制备 精密称取每个样品400mg，置于磨口的三角瓶中，加入014mL10%的氨溶液，搅拌均匀，加入10mL乙醚，超声30min后在补加5mL乙醚，放置过夜，过滤，分别用5mL的乙醚洗涤3次滤渣，合并醚液，挥干，用乙腈洗涤残渣定容为5mL，冷藏备用。 |
操作步骤： |
吸取对照品溶液和供试品溶液10μL,在上述色谱条件下，注入液相色谱仪测定，外标法计算含量。 |
附件： |
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备注： |
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参考文献： |
赵英永,崔秀明,戴云等.高效液相色谱法测定草乌类药用植物活性成分含量.中国药学杂志.2007,42(11):815-818 |
