| 公开(公告)号 | CN1888078A |
| 公开(公告)日 | 2007.01.03 |
| 申请(专利)号 | CN200510120597.4 |
| 申请日期 | 2005.12.31 |
| 专利名称 | 细胞内筛选抗乙型肝炎病毒药物的方法 |
| 主分类号 | C12Q1/18(2006.01)I |
| 分类号 | C12Q1/18(2006.01)I;C12Q1/68(2006.01)I |
| 分案原申请号 | |
| 优先权 | |
| 申请(专利权)人 | 武汉生物制品研究所 |
| 发明(设计)人 | 方志正;刘汉平 |
| 地址 | 430060湖北省武汉市武昌区临江大道7号 |
| 颁证日 | |
| 国际申请 | |
| 进入国家日期 | |
| 专利代理机构 | 武汉开元专利代理有限责任公司 |
| 代理人 | 樊 戎 |
| 国省代码 | 湖北;42 |
| 主权项 | 一种细胞内筛选抗乙型肝炎病毒药物的方法，其特征是：它是基于HepG2细胞内乙肝病毒基因组瞬时表达细胞模型，以HBVfxRNA、trxRNA和HBcAg为药效评价指标，以相应的引物和竞争子对实验组和对照组HBV fxRNA、HBV trxRNA定量分析，以ECL技术分析HBcAg并以它们为药效评价指标来筛选抗乙肝病毒药物，其具体步骤如下： (1)乙肝病毒全基因和CN基因以磷酸钙共转染HepG2细胞，并设加药物共同转染的实验组和不加药物转染的对照组； (2)转染后培养细胞4天，收获细胞，提取细胞内总RNA和蛋白质； (3)将总RNA逆转录为cDNA，与相应的竞争子作竞争聚合酶链反应，从而对实验组和对照组的HBV fxRNA、HBV trxRNA进行定量分析； (4)将实验组和对照组的蛋白质以ECL技术对HBcAg进行分析，通过HBV fxRNA、HBV trxRNA和HBcAg的检测结果筛选抗乙肝病毒药物。 |
| 摘要 | 本发明涉及一种乙型肝炎病毒药物的筛选方法，具体地说是一种细胞内筛选抗乙型肝炎病毒药物的方法。它是基于HepG2细胞内乙肝病毒基因组瞬时表达细胞模型或稳定表达的细胞系HepG2 2.2.15细胞，以HBV fxRNA、trxRNA和HBcAg为药效评价指标，以相应的引物和竞争子对实验组和对照组HBV fxRNA、HBV trxRNA定量分析，以ECL技术分析HBcAg并以它们为药效评价指标来筛选抗乙肝病毒药物。本发明对HBV生命周期的前期阶段RNA的复制有抑制作用，能够有效的抑制HBV复制。采用本发明方法可以比较简便、有效和经济地大量初筛抗乙肝病毒(HBV)药物。 |
| 国际公布 |
