公开(公告)号 | CN1727361A |
公开(公告)日 | 2006.02.01 |
申请(专利)号 | CN200410050936.1 |
申请日期 | 2004.07.28 |
专利名称 | 重组人干扰素α1b的纯化工艺 |
主分类号 | C07K14/56(2006.01)I |
分类号 | C07K14/56(2006.01)I;C07K1/36(2006.01)I |
分案原申请号 | |
优先权 | |
申请(专利权)人 | 深圳科兴生物工程股份有限公司 |
发明(设计)人 | 何 询;于德强;张 为 |
地址 | 518057广东省深圳市南山区科技工业园科技路13号 |
颁证日 | |
国际申请 | |
进入国家日期 | |
专利代理机构 | 深圳睿智专利事务所 |
代理人 | 陈鸿荫;周惠来 |
国省代码 | 广东;44 |
主权项 | 一种重组人干扰素α1b的纯化工艺,用于从表达人干扰素α1b的工程菌中提取重组人干扰素α1b,包括细菌破碎,以及目标蛋白的捕获、中间纯化和精制过程,其特征在于:所述目标蛋白的捕获过程采用扩张床吸附,中间纯化过程采用亲合层析,精制过程采用凝胶过滤。 |
摘要 | 一种重组人干扰素α1b的纯化工艺,用于从表达人干扰素α1b的工程菌中提取重组人干扰素α1b,包括细菌破碎、扩张床吸附、亲合层析和凝胶过滤步骤。细菌破碎是在Tris-HCl缓冲液中进行;所述扩张床吸附步骤中,选用阴离子凝胶,缓冲体系选用pH值为7.4的Tris-HCl,并选用0.4MNaCl pH7.4 50mM Tris-Hcl洗脱液一步洗脱。所述亲和层析步骤中,选用α1b干扰素的单克隆抗体偶联的凝胶;平衡液采用PBS,清洗液采用PBS,洗脱液采用0.1M Gly-HCl,再生液采用0.1M Tris-HCl及0.1M NaAc-HAc缓冲液。所述凝胶过滤步骤中,选用Sephacryl凝胶,缓冲体系选用PBS。采用本重组人干扰素α1b的纯化工艺,生产效率可以大大提高,生产成本则大大降低。 |
国际公布 |