公开(公告)号 | CN1231594C |
公开(公告)日 | 2005.12.14 |
申请(专利)号 | CN00105974.2 |
申请日期 | 2000.04.24 |
专利名称 | 天然折叠和分泌型蛋白质的制备方法 |
主分类号 | C12P21/00 |
分类号 | C12P21/00 |
分案原申请号 | |
优先权 | 1999.4.26 EP 99107412.1 |
申请(专利权)人 | 霍夫曼-拉罗奇有限公司 |
发明(设计)人 | 多萝特·安布罗修斯;赖纳·鲁道夫;约尔格·舍夫纳;伊丽莎白·施瓦茨 |
地址 | 瑞士巴塞尔 |
颁证日 | |
国际申请 | |
进入国家日期 | |
专利代理机构 | 中科专利商标代理有限责任公司 |
代理人 | 姜兆元 |
国省代码 | 瑞士;CH |
主权项 | 生产一种含有通过二硫键连接的二个或几个半胱氨酸的、水溶性的、天然折叠真核多肽的方法,其是通过在多肽分泌到周质或培养基中的条件下培养原核生物的细胞,切除信号序列,并从周质或培养基中分离该多肽进行的,其中所说的原核生物的细胞含有编码所说的在N-末端含有原核生物的信号序列的多肽的一个表达载体,其中该培养是在有精氨酸或通式(I)的一种化合物存在下进行的R2-CO-NRR1(I)其中R和R1代表氢或一种饱和的或不饱和的支链或直链C1-C4烷基链和R2代表氢、NHR1或饱和的或不饱和的支链或直链C1-C3烷基链和以0.1mol/l-5mol/l的浓度将精氨酸或通式I的化合物添加到营养培养基,和以0.1mmol/l-15mmol/l的浓度将还原性硫醇试剂添加到营养培养基中。 |
摘要 | 一种通过培养原核生物的细胞生产一种通过二硫键连接二个或几个半胱氨酸的、水溶性的、天然折叠真核多肽的方法,a)其中所说的原核细胞含有编码所说的在N-末端含有原核生物的信号序列的多肽的一个表达载体,b)在多肽分泌到周质或培养基中的条件下,c)切除信号序列,并从周质或培养基中分离该多肽。其中该培养是在有精氨酸或通式(I)的一种化合物存在下进行的R2-CO-NRR1(I)其中R和R1代表氢或一种饱和的或不饱和的支链或直链C1-C4烷基链和R2代表氢、NHR1或饱和的或不饱和的支或直链C1-C3烷基链,该方法适于用原核生物以高产率重组生产多肽。 |
国际公布 |