| 公开(公告)号 | CN1508265A |
| 公开(公告)日 | 2004.06.30 |
| 申请(专利)号 | CN02155058.1 |
| 申请日期 | 2002.12.20 |
| 专利名称 | 白细胞介素－2及其基因在戒毒应用中的测试方法 |
| 主分类号 | C12Q1/68 |
| 分类号 | C12Q1/68;G01N33/68;A61K48/00;A61K38/20;A61P25/36 |
| 分案原申请号 | |
| 优先权 | |
| 申请(专利权)人 | 中国科学院上海生命科学研究院 |
| 发明(设计)人 | 刘新恒;顾锦法;王晋慧;姚明忠 |
| 地址 | 200031上海市岳阳路319号 |
| 颁证日 | |
| 国际申请 | |
| 进入国家日期 | |
| 专利代理机构 | 上海新天专利代理有限公司 |
| 代理人 | 王巍 |
| 国省代码 | 上海;31 |
| 主权项 | 白细胞介素-2IL-2及其基因在戒毒应用中的测试方法，其特征在于该方法包括下列步骤：(1)真核表达质粒pcDNA3-IL-2的构建人IL-2基因经EcoRI和XhoI酶切得到有EcoRI和XhoI接头的全长含信号肽的人IL-2 cDNA 462bp克隆入经相同酶切的pcDNA3载体Invitrogen，IL-2基因在CMV启动子的控制下表达，构建的质粒转化入大肠杆菌JM109扩增，碱裂解法制备质粒，聚乙二醇沉淀法纯化，通过测定260nm的光吸收来确定质粒浓度，注射时质粒稀释于含5％葡萄糖的磷酸缓冲液中；(2)重组腺病毒Ad5-IL-2的构建人IL-2基因经EcoRI和XhoI酶切得到有EcoRI和XhoI接头的全长含信号肽的人IL-2 cDNA 462bp克隆入经相同酶切的pCA13载体Microbix，得到pCA13-IL-2，此时IL-2基因在CMV启动子的控制下表达，pCA13-IL-2与腺病毒基因组质粒pBHG10 Microbix共转染293细胞，进行同源重组，筛选重组腺病毒，扩增纯化腺病毒，注射时病毒稀释于含5％蔗糖的PBS中；(3)吗啡依赖小鼠模型的建立以剂量递增法形成吗啡依赖小鼠模型，此组小鼠为吗啡依赖组，吗啡依赖小鼠腹腔注射纳洛酮4mg.kg-1可激发戒断症状，此组小鼠为吗啡戒断组；(4)吗啡依赖大鼠模型的建立以剂量递增法形成吗啡依赖大鼠模型，此组大鼠为吗啡依赖组，吗啡依赖大鼠腹腔注射纳洛酮4mg.kg-1可激发戒断症状，此组大鼠为吗啡戒断组；(5)IL-2蛋白及pcDNA3质粒介导IL-2基因抑制小鼠吗啡戒断症状测试方法的建立用剂量递增法建立的吗啡成瘾小鼠模型，在末次给吗啡3小时后，将成瘾的小鼠随机分为8组，每组10只，蛋白治疗组：经第52 |
| 摘要 | 本发明属基因工程技术领域。本发明公开了一种白细胞介素-2(IL-2)及其基因在戒毒应用中的测试方法。通过本发明的方法表明蛛网膜下腔注射IL-2蛋白有较好的戒毒作用，其效果呈剂量依赖性。pcDNA3-IL-2基因也有一定的戒毒作用，通过对该基因导入条件的进一步优化，其戒毒效果可望更好，更适合实际实用。 |
| 国际公布 |
