| 公开(公告)号 | CN101073666A |
| 公开(公告)日 | 2007.11.21 |
| 申请(专利)号 | CN200710098289.5 |
| 申请日期 | 2007.05.11 |
| 专利名称 | 一种制备高纯度胰激肽原酶原料药的方法 |
| 主分类号 | A61K38/48(2006.01)I |
| 分类号 | A61K38/48(2006.01)I;A61K9/19(2006.01)I;C12N9/64(2006.01)I;A61P3/06(2006.01)I;A61P3/10(2006.01)I;A61P7/02(2006.01)I;A61P9/10(2006.01)I;A61P9/12(2006.01)I;A61P25/02(2006.01)I;A61P27/02(2006.01)I |
| 分案原申请号 | |
| 优先权 | |
| 申请(专利权)人 | 上海丽珠制药有限公司 |
| 发明(设计)人 | 万龙岩;陈一平;杨志建 |
| 地址 | 201206上海市浦东金桥出口加工区桂桥路1150号 |
| 颁证日 | |
| 国际申请 | |
| 进入国家日期 | |
| 专利代理机构 | 北京泛华伟业知识产权代理有限公司 |
| 代理人 | 郭广迅 |
| 国省代码 | 上海;31 |
| 主权项 | 一种制备高纯度胰激肽原酶原料药的方法，其特征在于包括以下步骤： 1.配制：配制0.15-0.5mol/L的NH4AC缓冲液和0.1-0.5mol/L的NH4AC缓冲液，调整至pH6.0，并测电导值； 2.层析： 2.1平衡：将装有QAE-SepharoseFastFlow离子柱填料的层析柱，用pH6.0的0.15-0.5mol/L的NH4AC缓冲液平衡，直至进出溶液pH值一致、电导值相同后平衡完毕； 2.2进样：调胰激肽原酶中间体的pH值与平衡液相近(6.1～6.2)，电导值略低于平衡液电导值(略低0.2～0.3×104μs/cm)，根据每升填料最大交换量2000万单位计算上样量并将上样液上柱； 2.3洗涤：用pH6.0的0.15-0.5mol/L的NH4AC缓冲液冲洗柱子，同时用分光光度计跟踪检测流出液在280nm处的吸收值，冲洗至洗出液OD值低于0.5时停止； 2.4洗脱：用pH6.0的0.1-0.5mol/L的NH4AC缓冲液以500～600ml/min流速洗脱柱子，同时用分光光度计进行跟踪检测其在253nm处的吸收值，收集峰液； 3.超滤脱盐：将收集液加纯化水超滤脱盐浓缩，当超出液电导值小于0.1×104μs/cm以下时，即可停止加纯化水，继续浓缩； 4.浓缩液过滤； 5.加辅料冻干； 6.过筛、分装。 |
| 摘要 | 本发明涉及一种制备高纯度生物原料药的方法，特别是一种高纯度胰激肽原酶原料药的方法。该方法由胰激肽原酶中间体在优化的分离条件下，经过QAE-Sepharose Fast Flow离子柱层析纯化制得的激肽原酶的原料药。该原料药的纯度高达75％以上，效价增加55单位/mg以上，比活达到350单位/mg蛋白以上。 |
| 国际公布 |
