公开(公告)号 | CN100357316C |
公开(公告)日 | 2007.12.26 |
申请(专利)号 | CN200410041095.8 |
申请日期 | 2004.06.23 |
专利名称 | 人类细胞中体的蛋白质复合物的分离方法 |
主分类号 | C07K1/30(2006.01)I |
分类号 | C07K1/30(2006.01)I |
分案原申请号 | |
优先权 | |
申请(专利权)人 | 中国科学技术大学 |
发明(设计)人 | 姚雪彪;符传孩;缪 勇;薛 宇 |
地址 | 230026安徽省合肥市金寨路96号中国科学技术大学专利办公室 |
颁证日 | |
国际申请 | |
进入国家日期 | |
专利代理机构 | 安徽合肥华信知识产权代理有限公司 |
代理人 | 余成俊 |
国省代码 | 安徽;34 |
主权项 | 人类细胞中体的蛋白质复合物的分离方法,包括将人体细胞培养同步化及收集、加入低渗液重悬并孵育使收集细胞膨胀、破碎重悬的膨胀细胞后取出上清、通过密度梯度进行离心分离并利用去污剂抽提纯化得到中体蛋白质复合物、分离鉴定中体蛋白种类,其特征在于,所述人体细胞培养同步化及收集过程中,所述同步化培养、收集的细胞是有丝分裂末期的人体细胞,其步骤为:(1)使细胞同步于G1/S期;(2)使细胞同步通过S期;(3)使细胞同步在有丝分裂前中期;(4)使细胞高度同步在有丝分裂末期;(5)用常规方法收集处于有丝分裂末期的细胞。 |
摘要 | 本发明涉及涉及人体细胞分离技术。所述的人类细胞中体的蛋白质复合物,它至少由129种蛋白组成,其中有30种细胞骨架蛋白、4种中心体蛋白、6种囊泡转运相关蛋白、6种染色体调节蛋白、2种马达蛋白、3种检测点蛋白、7种降解调控蛋白、9种膜蛋白、12种转录与翻译相关蛋白、28种蛋白激酶、5种线粒体蛋白、9种分子伴侣蛋白和7种未知类蛋白。在分离方法中,包括将人体细胞培养同步化及收集、加入低渗液重悬并孵育使收集细胞膨胀、破碎重悬的膨胀细胞后取出上清、通过密度梯度进行离心分离并利用去污剂抽提纯化蛋白质复合物、分离鉴定中体蛋白种类。人类细胞中体的蛋白质复合物组成的揭示为筛选抗肿瘤药物提供了模式系统和靶标蛋白ezrin及靶位。 |
国际公布 |