公开(公告)号
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CN101148681A
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公开(公告)日
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2008.03.26
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申请(专利)号
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CN200610123015.2
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申请日期
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2006.10.27
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专利名称
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一种靶向性共表达p53和Mda-7的重组腺病毒
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主分类号
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C12N15/861(2006.01)I
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分类号
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C12N15/861(2006.01)I;C12N15/12(2006.01)I;C12N15/24(2006.01)I;C12N15/28(2006.01)I;A61K48/00(2006.01)I;A61P35/00(2006.01)I
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分案原申请号
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优先权
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申请(专利权)人
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王尚武
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发明(设计)人
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王尚武
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地址
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523808广东省东莞市松山湖高新技术产业园留学生创业园
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颁证日
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国际申请
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进入国家日期
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专利代理机构
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代理人
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国省代码
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广东;44
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主权项
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一种靶向性共表达新型p53和Mda-7的重组腺病毒。本发明使用的腺病毒载体为Stratagene公司的产品AdEasy-1载体,为E1和E3区缺失的腺病毒载体。本发明构建的表达盒由肿瘤特异性动子、新型p53、IRES、Mda-7和SV40多聚腺嘌呤组成,其主要特征为: a).人野生型p53抑癌基因的第72位氨基酸由脯氨酸突变成为精氨酸,其他氨基酸组成及其排列顺序不变; b).P53抑癌基因在其N-末端以内切酶EcoR V和C-末端以内切酶Not1片段拼接于pIRES质粒上游; c).Mda-7基因在其N-末端以内切酶Sma1和C-末端以内切酶Xba1片段拼接于pIRES质粒下游; d).肿瘤特异性启动子在其N-末端以内切酶Nru1和C-末端以内切酶EcoRV片段拼接于新型p53基因的上游; 经重组后,该表达盒位于腺病毒载体的E1缺失区。该重组腺病毒具有靶向性共表达p53和Mda-7的作用,因而具有更强细胞凋亡功能、抗癌谱更广的生物功能。
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摘要
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本发明叙述了一种构建靶向性共表达新型肿瘤抑制基因p53和Mda-7的表达盒结构的重组腺病毒的方法及其用途和意义,其主要特征为1)野生型P53抑癌基因的第72位氨基酸由脯氨酸突变成为精氨酸,其他氨基酸组成及其排列顺序不变;2)通过内部核糖体结合位点将新型肿瘤抑制基因p53和Mda-7基因连接;3)该表达盒的启动子由肿瘤特异性启动子PEG-3来驱动;4)该重组腺病毒是复制缺陷型的血清A5型腺病毒。该新型腺病毒具有靶向性共表达二种抗癌基因,即新型肿瘤抑制基因p53和Mda-7基因,其产物具有更强细胞凋亡生物功能,但对正常细胞不会造成损伤。因此,在肿瘤,尤其是恶性肿瘤的基因治疗中将具有重要意义。
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国际公布
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