口蹄疫防治技术之实验室诊断
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口蹄疫（Foot and Mouth Disease ，FMD)是由口蹄疫病毒（FMDV)引起的偶蹄动物的急性、热性、高度接触性、烈性传染病，其临床表现以口腔粘膜、舌面、鼻镜、蹄部、乳房皮肤发生水泡和溃烂为特征。从这些表面特征就可以基本上判断出这种病，但是要确诊还必须通过实验室诊断。口蹄疫病毒具有多型性，故口蹄疫实验室诊断不仅要确定病性，而且要鉴定病毒型。应无菌操作采取病毒的水疱皮、水疱液或
发热时的血液或者恢复期血清，专人送往有关检验部门检验。 一． 血清学诊断方法 血清学诊断方法在FMD的监测方面十分有效，包括补体结合试验、中和试验、凝集试验、免疫扩散试验、沉淀试验、免疫电泳、免疫荧光和放射免疫等技术。目前被广泛应用的有琼脂扩散试验、补体结合试验、中和试验、间接血凝试验、酶联免疫吸附试验。 (1) 琼脂扩散试验 该方法既可以检测病毒抗原，也可以检测抗体。在琼脂中FMDV抗原和标准阳性血清或未知的被检血清之间形成免疫沉淀线，并能在48h之内提供结果。长期以来，该试验主要用于血清样品中FMDV的检测。 (2) 补体结合试验(CFT) CFT既可鉴定抗原，又可鉴定抗体，并可定量。但CFT方法相对不够敏感，且有易解释样品的亲补体活性和抗补体活性。 (3) 病毒中和试验(VNT) 病毒中和试验是利用血清中和抗体与病毒特异性的结合作用，使病毒失去吸附细胞的能力或抑制其侵入和脱衣壳，丧失对易感动物和敏感细胞的感染力。 （4)口蹄疫反转录聚合酶链反应（RT-PCR) 用于检测疑似感染动物水疱皮或水疱液中所有血清型口蹄疫病毒，适用于口蹄疫病毒的检测、诊断和
流行病学调查。 二． 口蹄疫液相阻断ELISA诊断试剂盒 1． O型口蹄疫液相阻断ELISA诊断试剂盒 液相阻断ELISA是国际兽疫局（OIE)推荐的检测口蹄疫病毒抗体的标准方法。用分离于我国的口蹄疫O型毒株研制出液相阻断ELISA试剂盒，用于测定牛、猪、
羊血清中针对O型口蹄疫病毒结构蛋白的抗体。本试剂盒主要用途，一是对进出口动物口蹄疫病毒抗体监测；二是监测口蹄疫疫苗免疫抗体，以评价动物群体抗感染能力。 2、口蹄疫病毒非结构蛋白抗体检测试剂盒（3ABC-I-ELISA)本试剂盒适用于活畜进出口调运、疫区净化检疫和群体无症状感染评价，检测活畜血清中口蹄疫病毒非结构蛋白3ABC抗体，以区分感染和免疫动物。 三． 对口蹄疫和猪水泡病间接血凝诊断的正确使用。 猪口蹄疫与猪水泡病不好区别，在鉴别诊断上要重点做好这两个病，采用反向间接血凝诊断实验可以有很好的效果。 在实际生产中，为了监测口蹄疫抗体的效价，为了预防口蹄疫，为了鉴别口蹄疫，为了确诊口蹄疫，采用实验室检测的手段都是很要必要的！
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使用ELISA诊断试剂盒
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实验室检测诊断
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