猪圆环病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪链球菌、猪附红细胞体混
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在华东地区某猪场暴发种母猪急性死亡为主要特征的疫情，种母猪体温升高，全身
黄疸，排茶色尿等症状，引起大批死亡，给猪场造成严重的经济损失，根据
流行病学调查、临床症状、病理变化并结合实验室检验，诊断该病为猪圆环病毒、猪繁殖呼吸综合征病毒、猪链球菌和猪附红细胞体混合感染，报告如下。?1 材料1.1 病料 临床上以全身黄疸，排茶色尿等典型症状病死猪2头，取肺、扁
桃体、脾、淋巴结、肾等组织待检。?1.2 小鼠
扬州大学实验动物中心20 g的青年小鼠?2 方法和结果 ?2.1 流行病学调查 该猪场从外地购回种母猪100头，商品猪500头，建场以来生产正常。7月初，种母猪出现体温升高，全身黄疸，发病1～2天，突然死亡，发病1个月，该猪场种母猪已死亡30头，发病80头，商品猪正常。2.2 症状表现 患猪精神沉郁，体温40～42℃，食欲减少，
嗜睡，呼吸加快，体表淋巴结肿大，少数猪
腹泻、关节肿大，不愿站立或行走，患猪病后期，全身黄疸，排茶色尿，
酱油色粪便，病程1～7天。?2.3 病理变化 剖检2头典型症状的病死猪，主要病变：皮下脂肪黄染、
水肿，腹股沟淋巴结、肺门淋巴结出血、肿大，肠系膜淋巴结实质性肿大并见化脓性病灶，胸、
腹水增多，肺虾肉样变，呈紫褐色，肝小叶结缔组织增生，脾肿大，肾水肿，被膜有白色坏死灶，膀胱出血，心冠脂肪出血，胃黏膜剥落，回结肠壁变薄。2.4 实验室检验?2.4.1 细菌学检查（1)无菌采集耳静脉血滴于载玻片上，加生理盐水稀释后，盖上盖玻片，镜检，可见红细胞周围附着大量虫体，有单个、多个，且具有较强的折光性，中央发亮，形似空泡，感染红细胞形态也发生变化，呈齿轮等不规则形状。取心血涂片，瑞氏染色，镜检，可见单个或成对的革兰氏阳性球菌。（2)取心血分别接种普通琼脂、血液琼脂平板，置37℃温箱中培养14～16 h后，可见普通琼脂中生长有半透明、露滴状菌落，直径约1～2 mm，血液琼脂中形成光滑、边缘整齐、半透明小菌落，周围呈β溶血，不形成荚膜，V-P反应为阳性。挑取单个菌落涂片，革兰氏染色，镜检，可见大量成对或链状排列的革兰氏阳性球菌。（3)在
葡萄糖、蔗糖、乳糖、
麦芽糖、果糖、木糖、阿拉伯糖、山梨醇、
甘露醇、卫矛醇等培养基中均为阳性，在水杨苷、棉子糖、菊糖、侧
金盏花醇等培养基中呈阴性。（4)将细菌按5～10×108 CFU细菌/鼠的剂量腹腔接种20 g的青年小鼠4只，在2天?内死亡，剖检发现小鼠脾脏肿大，并从死亡小鼠的心血、脾脏分离到革兰氏阳性的链球菌，确诊为致病性链球菌。?2.4.2 圆环病毒诊断取送检猪的肺、扁桃体、脾、腹股沟淋巴结、肠系膜淋巴结按常规方法提取细胞中的DNA作模板，以PCR方法扩增，并将PCR产物在1.2%琼脂糖电泳，EB染色，观察拍照，结果在420 bp处出现明显条带，且与阳性对照一致，故可判为PCV2阳性，即送检猪均发现有圆环病毒感染。?2.4.3 猪繁殖与呼吸综合征病毒检验采用IIFIFC法，用本室保存的3株单克隆抗体（1f9、5A5、5H8)检测，结果均为强阳性，可判定该送检猪感染猪繁殖与呼吸综合征病毒。?根据实验室检验，2份检样中同时有PCV2、PRRSV、猪链球菌和猪附红细胞体等病原存在，再结合临床症状及病理剖检，确诊本病为猪圆环病毒2型、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪链球菌和猪附红细胞体混合感染。
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