牛黄降压丸—芍药苷的含量测定—高效液相色谱法

本方法采用高效液相色谱法测定牛黄降压丸中芍药苷的含量。

本方法适用于牛黄降压丸制剂或成药。

用反相高效液相色谱法分析芍药苷, 根据样品和标准品在232nm下的吸收峰，通过工作曲线定量测定牛黄降压丸中芍药苷的含量。

1. 甲醇（色谱纯)

2. 异丙醇（分析纯)

3. 醋酸（分析纯)

1 仪器

1.1 高效液相色谱仪

1.2 色谱柱

色谱柱 ODS-5 (416 mm ×150mm , 5μm)

1.3 紫外吸收检测器

2 色谱条件

2.1 流动相： 甲醇 异丙醇 6%醋酸 水 = 25 2 2 71

2.2 检测波长：232nm

2.3柱温：室温

1.供试品溶液的制备

取牛黄降压丸适量, 剪碎,混匀, 精密称取2.0 g 于10 mL 离心管中, 加50%乙醇至刻度, 超声波提取3 次, 每次15 min, 离心3 600 r/min滤过, 合并滤液至50 mL 量瓶中, 加50% 乙醇稀释至刻度, 摇匀, 作为供试品溶液。

2.标准品溶液的制备

精密称取芍药苷对照品11.0m g, 加入50% 乙醇使溶解, 并定容于50mL 容量瓶中, 摇匀, 作为对照品溶液。

1.标准曲线的绘制

精密吸取标准品溶液1, 3, 5, 7, 9, 11 µL分别注入高效液相色谱仪，用紫外检测器测定芍药苷的色谱峰面积，以标准溶液浓度对峰面积绘制标准曲线，进行线性回归，得到回归方程。

2. 供试品的测定

分别精密吸取供试品溶液10μL注入高效液相色谱仪，照上述色谱条件进行试验，用紫外吸收检测器，于波长280nm处测定芍药苷的峰面积，以芍药苷对照品为参照物，外标法计算出其含量。

杨书良，HPLC 法测定牛黄降压丸中芍药苷的含量，中草药，2003，34（11)：1006-1007