公开(公告)号 | CN1189561C |
公开(公告)日 | 2005.02.16 |
申请(专利)号 | CN02134572.4 |
申请日期 | 2002.08.19 |
专利名称 | 发酵生产门冬酰胺酶的方法 |
主分类号 | C12N9/82 |
分类号 | C12N9/82;C12N1/20 |
分案原申请号 | |
优先权 | |
申请(专利权)人 | 广州市微生物研究所 |
发明(设计)人 | 梁淑娃;彭中健;杨冠东;杜少平 |
地址 | 510250 广东省广州市宝岗大道荔福路68号 |
颁证日 | |
国际申请 | |
进入国家日期 | |
专利代理机构 | 广州粤高专利代理有限公司 |
代理人 | 何燕玲 |
国省代码 | 广东;44 |
主权项 | 一种发酵生产门冬酰胺酶的方法,包括平板培养、种子罐培养、发酵罐培养,其特征在于:(1)平板培养:将冻干的大肠杆菌菌种用水溶解后,涂布至凝固有培养基的平皿上于36-40℃培养10-36小时;(2)种子罐培养:将(1)中已长好的平皿菌种接入种子罐中,在36-40℃,转速250-500转/分,风量1∶0.3-1∶1.2体积/体积/分的条件下,培养10-16小时;(3)发酵罐培养:将(2)中已培养好的种子罐菌种接入发酵罐中,接种量为10-30%,在36-40℃,转速180-350转/分,风量1∶0.3-1∶1.2体积/体积/分,pH6.5-7.5的条件下,培养10-16小时;其中平板培养所用培养基的组分及重量百分含量为:牛肉膏2-6%、NaCl0.1-2%、琼脂0.5-2.5%,pH6.5-7.5;其中种子罐和发酵罐培养所用的液体培养基的组分及重量百分含量为:牛肉膏2-6%、玉米浆0.5-4%、酵母粉0.5-2.5%、味精1-3%,pH6.5-7.5。 |
摘要 | 本发明属于生物发酵领域,提供了一种发酵生产门冬酰胺酶的方法。以大肠杆菌为出发菌进行发酵生产,在适合的培养基和培养条件下,能使门冬酰胺酶获得高效表达,产酶单位为50-80单位/毫升。使用本发明的方法生产门冬酰胺酶针剂,原材料成本大大降低。 |
国际公布 |