药物分析-授课教案:第七章　芳香胺类药物分析

基本内容

注解（进展、辅助

手段和时间分配)

1.芳胺类药物的分析

芳香胺类药物主要分为两类：对氨基苯甲酸酯类；酰胺类药物。

一、 结构与性质

(一) 对氨基苯甲酸酯类药物　

　　有对氨基苯甲酸酯的母体，结构通式如下：

1、典型药物：

苯佐卡因　　　　  　　　　　　 盐酸普鲁卡因

(Benzocaine)  (Procaine Hydrochloride)

盐酸丁卡因

(Tetracaine Hydrochloride)

盐酸普鲁卡因胺（抗心律失常药)化学性质与本类药物相似。结构如下：  

2、主要化学性质

1)芳伯氨基特性　显重氮化－偶合反应；与芳醛缩合反应；易氧化变色等。

2)水解特性 含酯键（或酰胺键)易水解。

3)弱碱性 除苯佐卡因外，脂烃胺侧链为叔胺氮原子，有弱碱性。能与生物碱沉淀剂发生沉淀反应；但在水溶液中不能用标准酸直接滴定，在非水溶剂中能滴定。

4)其它特性。　

讲授结合多媒体教学

复习旧课（3min)；

作业解析(5min)；

引入新课(2min)；

2min

讲解结构通式，引入典型药物

盐酸普鲁卡因的命名：

4-氨基苯甲酸2-（二乙氨基)乙酯盐酸盐

3min

盐酸丁卡因的命名：

4- (丁氨基) 苯甲酸-2-(二甲氨基) 乙酯盐酸盐。

盐酸普鲁卡因胺有命名：

N-〔(2-二乙氨基) 乙基〕－4－氨基苯甲酰胺盐酸盐。

7min

生成schiff碱(西fo碱)。P148盐酸普鲁卡因注射液中对氨基苯甲酸的检查采用此法显色(薄层色谱)。

3min

生物碱沉淀反应是利用大多数生物碱在酸性条件下，与某些沉淀剂反应生成弱酸不溶性复盐或络合物沉淀。

生物碱沉淀剂：碘化铋钾试剂、改良的碘化铋钾试剂等。

基本内容

注解（进展、辅助

手段和时间分配)

　　酰基衍生物，共性是具有芳酰氨基，基本结构为：

　　1、典型药物：对乙酰氨基酚（扑热息痛)等解热镇痛药、盐酸利多卡因和盐酸布比卡因等局部麻醉药及醋氨苯砜抗麻风药。结构为：

对乙酰氨基酚　　  　 醋氨苯砜　　　　　　　

(Paracetamol)  (Acedapsone)

盐酸利多卡因　　 　  　　　　盐酸布比卡因　

(Lidocaine Hydrochloride)    (Bupivacaine Hydrochloride)

2、主要化学性质

　  1)水解后显芳伯氨基特性　易水解为芳伯氨基，并显芳伯氨基特性反应。水解反应的速度受空间位阻影响。

　  2)水解产物易酯化　对乙酰氨基酚→醋酸→醋酸乙酯的香味。

3)酚羟基特性　对乙酰氨基酚(FeCl3)。

4)弱碱性　利多卡因和布比卡因的脂烃胺侧链有叔胺氮原子，显碱性，可以成盐，与生物碱沉淀剂发生沉淀反应。

　　5)与重金属离子发生沉淀反应　盐酸利多卡因等酰氨基上的氮可在水溶液中与铜离子或钴离子络合，生成有色的配位化合物沉淀。

　　此外，本类药物的紫外吸收和红外吸收光谱特征均可供分析用。

2min

醋氨苯砜的命名：

4,4’-磺酰基双（乙酰苯胺)

盐酸利多卡因：N-（2,6-二甲苯基)－ 2－（二乙氨基)乙酰胺盐酸盐一水合物。

盐酸布比卡因：N-（2,6-二甲苯基)－ 2－（二乙氨基)乙酰胺盐酸盐一水合物。

3min

利多卡因和醋氨苯砜无酚羟基特性，可区别。

基本内容

注解（进展、辅助

手段和时间分配)

(一) 重氮化－www.med126.com/yaoshi/偶合反应

分子结构中具有芳伯氨基或潜在芳伯氨基的药物，均可发生重氮化反应，生成的重氮盐可与碱性β－萘酚偶合生成有色的偶氮染料。

苯佐卡因、盐酸普鲁卡因和盐酸普鲁卡因胺(盐酸溶液中) + 亚硝酸钠进行重氮化反应；

对乙酰氨基酚和醋氨苯砜(盐酸或硫酸)加热水解 + 亚硝酸钠进行重氮化反应。

如盐酸普鲁卡因的鉴别反应如下：　

对乙酰氨基酚的鉴别方法：

(红色)

盐酸丁卡因结构中的芳香仲胺在酸性溶液中与亚硝酸钠反应，生成乳白色的 N－亚硝基化合物沉淀

1min

通过对化学性质的分析，引入鉴别试验。

提示：具有芳伯氨基及潜在芳伯氨基的药物处理方法不同。

5min

可与具有芳伯氨基的同类药物区别

此处盐酸丁卡因作为一特例讲解。

基本内容

注解（进展、辅助

手段和时间分配)

对乙酰氨基酚

【鉴别】  (1) 本品的水溶液加三氯化铁试液，即显蓝紫色。   

(三) 与重金属离子反应

1.与Cu²⁺和Co²⁺反应　盐酸利多卡因，在碳酸钠试液中，与硫酸铜反应生成蓝紫色配位化合物，溶于氯仿则显黄色。（盐酸普鲁卡因、盐酸丁卡因和苯佐卡因等无此反应)。

盐酸利多卡因：[中国药典(2005年版)]

^【鉴别】 

    (2) 取溶液2ml ，加硫酸铜试液0.2ml 与碳酸钠试液1ml,即显蓝紫色；加氯仿2ml,振摇后放置，三氯化碳层显黄色。

盐酸利多卡因，在酸性溶液中与氯化钴试液反应，生成亮绿色细小钴盐沉淀。(药典)

2. 与Hg²⁺反应　盐酸利多卡因 + 硝酸汞试液煮沸→显黄色；对氨基苯甲酸酯类药物显红色或橙黄色，可与之区别。

3. 羟肟酸铁盐反应　盐酸普鲁卡因胺分子中具有芳酰胺结构，加入浓过氧化氢溶液，缓缓加热至沸后，先被氧化成羟肟酸，再与三氯化铁作用形成配位化合物羟肟酸铁，其溶液显紫红色，随即变为暗棕色至棕黑色。中国药典2005年版采用本法鉴别盐酸普鲁卡因胺。

5min

复习无机化学中及前几次课中的相关知识：

此处配位单元本身就是配合物。此处配位单元本身就是配合物。配位单元是由一定数目含有孤对电子的分子或离子与金属离子以配位键结合而成的结构单元。配位单元如带电荷叫配离子，它能再与电荷相反的离子形成配合物。配位单元如不带电荷称为配位分子，这时配位单元本身就是配合物。

2min

盐酸普鲁卡因、盐酸丁卡因和苯佐卡因等无Cu²⁺和Co²⁺反应

基本内容

注解（进展、辅助

手段和时间分配)

(四) 水解产物反应

　　本类药物分子中有些具有酯的结构，在碱性条件下水解，利用其水解产物与试剂的反应进行鉴别。中国药典2005年版采用此法鉴别盐酸普鲁卡因、苯佐卡因。

1. 盐酸普鲁卡因的鉴别方法　取本品约0.1g，加水2ml溶解后，加10％氢氧化钠溶液1ml，即生成白色沉淀，加热变为油状物（普鲁卡因)；继续加热，产生的蒸汽（二乙氨基乙醇)能使湿润的红色石蕊试纸变为蓝色；热至油状物消失后（生成可溶于水的对氨基苯甲酸钠)，放冷，加酸酸化，即析出白色沉淀。此沉淀能溶于过量的盐酸。

2. 苯佐卡因的鉴别方法

(五) 制备衍生物测熔点

1.三硝基苯酚衍生物  盐酸利多卡因与三硝基苯酚反应，生成能难溶于水的三硝基苯酚利多卡因黄色沉淀；滤过，沉淀用水洗涤后，105℃干燥后，熔点约为228～232℃。盐酸布比卡因与三硝基苯酚按此法制备的三硝基苯酚布比卡因衍生物，其熔点约为194℃。

卤仿反应：乙醛或甲基酮在碱性条件下与卤素作用(常用次卤酸钠如NaOI或卤素的碱溶液如Br2+OH-)，三个α氢原子可完全被卤素取代。特别是生成的碘仿，为难溶于水的黄色固体，并有特殊臭味，极易识别。

2min

此处的熔点测定为鉴别，其自身的熔点为性状。

如盐酸利多卡因：

【性状】

熔点  本品的熔点（附录Ⅵ C)为75～79℃。

基本内容

注解（进展、辅助

手段和时间分配)

中国药典(2005年版)盐酸利多卡因的鉴别：

【鉴别】  取本品0.2g，加水20ml溶解后，照下述方法试验。  

(1) 取溶液10ml，加三硝基苯酚试液10ml，即生成沉淀；滤过，沉淀用水洗涤后，干燥，依法测定（附录Ⅵ C)，熔点为228 ～232 ℃，熔融时同时分解。

2.硫氰酸盐衍生物

中国药典(2005年版)盐酸丁卡因的鉴别：

【鉴别】  (1) 取本品约0.1g，加5 ％醋酸钠溶液10ml溶解后，加25％硫氰酸铵溶液1ml,即析出白色结晶；滤过，结晶用水洗涤，在80℃干燥，依法测定（附录Ⅵ C)，熔点约为131 ℃。

(六) 紫外特征吸收光谱

2min

3min

请同学注意：此表中Ch.P(2005)中对乙酰氨基酚的UV图谱是用于含量测定，而非教材中所写的用于鉴别。

基本内容

注解（进展、辅助

手段和时间分配)

(七) 红外吸收光谱

以盐酸普鲁卡因与盐酸普鲁卡因胺的红外图谱为例说明。

   图 盐酸普鲁卡因与盐酸普鲁卡因胺的红外吸收光谱(氯化钾压片法)

表  盐酸普鲁卡因与盐酸普鲁卡因胺的红外吸收光谱的主要区别

四、杂质检查

(一) 对乙酰氨基酚的杂质检查

合成工艺：A、对硝基氯苯→水解→对硝基酚→还原→对氨基酚→乙酰化，制得；B、酚→亚硝化、还原→对氨基酚，乙酰化。在生产过程中除可能引入一般杂质外，还可能引入特殊的杂质。

5min

强调：

酯羰基、酯基与酰胺基在光谱上的不同。

8min

基本内容

注解（进展、辅助

手段和时间分配)

　　检查方法　取本品1.0g，加乙醇10ml溶解后，溶液应澄清，无色；如显浑浊，与1号浊度标准液比较，不得更浓；如显色，与棕红色2号或橙红色2号标准液比较,不得更深。

2. 有关物质  主要包括中间体、副产物及分解产物。例如：对氨基酚、对氯乙酰苯胺、O-乙酰基对乙酰氨基酚、偶氮苯、氧化偶氮苯、苯醌和醌亚胺等。以对硝基氯苯为原料，可能引入对氯乙酰苯胺，药典采用薄层色谱法对此项杂质进行限度检查。

　　检查方法 取本品的细粉1.0g，置具塞离心管或试管中，加乙醚5ml，立即密塞，振摇30分钟，离心或放置澄清，取上清液作为供试品溶液；另取每 1ml中含对氯乙酰苯胺1.0mg的乙醇溶液适量，用乙醚稀释成每1ml中含50μg的溶液作为对照液。吸取供试品溶液200μl与对照溶液40μl，分别点于同一硅胶GF254 薄板上。以氯仿－丙酮－甲苯（13:5:2)为展开剂，展开后，晾干，置紫外光灯（254nm)下检视，供试品溶液如显杂质斑点，与对照溶液的主斑点比较，不得更大，更深。

3.对氨基酚 本品在合成过程中，由于乙酰化不完全或贮藏不当发生水解，均可引入对氨基酚，使本品产生色泽并对人体有毒性，应严格控制其限量。

利用对氨基酚在碱性条件下可与亚硝基铁氰化钠生成蓝色配位化合物，而对乙酰氨基酚无此反应的特点，与对照品比较，进行限量检查。

检查方法 取本品1.0g，加甲醇溶液（1→2)20ml溶解后，加碱性亚硝基铁氰化钠试液1ml，摇匀，放置30min；如显色，与对乙酰氨基酚对照品1.0g加对氨基酚50μg用同一方法制成的对照液（临用配制)比较，不得更深(0.005％)。

比色：检查中间体对氨基酚；

比浊：检查还原剂铁粉。

此检查方法应参考。因对乙酰氨基酚中除对氨基酚外，还可能有其它副产物及分解产物。例如：苯醌和醌亚胺等。因此采用平行的原则即对照品对乙酰氨基酚加对氨基酚的方法排除其它杂质的干扰。

提醒学生借鉴其检查方法

基本内容

注解（进展、辅助

手段和时间分配)

杂质来源  水解产生

检查方法  TLC  杂质对照品法 限度不得超过1.2％。

五、含量测定

(一) 亚硝酸钠滴定法

中国药典（2005年版)收载用本法测定含量的有：苯佐卡因、盐酸普鲁卡因及其片剂，盐酸普鲁卡因胺及其片剂与注射液，醋酸氨苯砜及其注射液。

1. 原理　芳伯氨基药物在酸性溶液中与亚硝酸钠定量反应，生成重氮盐。

2.测定的主要条件　

　　1)加入适量溴化钾加快反应速度：在盐酸存在下，重氮化反应的历程为：

慢 快 快

整个反应的速度取决于第一步，而第一步反应的快慢与含芳伯氨基化合物中芳伯氨基的游离程度有密切关系。如芳伯氨基的碱性较弱，则在一定强度酸性溶液中成盐的比例较小，即游离芳伯氨基多，重氮化反应速度就快；反之，则游离芳伯氨基较少，重氮化反应速度就慢。所以，在测定中一般向供试溶液中加入适量溴化钾（中国药典规定加入2g)，使重氮化反应速度加快。

　　溴化钾与盐酸作用产生溴化氢，后者与亚硝酸作用生成NOBr：

HNO₂ ＋ HBr → NOBr ＋H₂O 　　　　(1)

若供试溶液中仅有HCl，则生成NOCl：

　　　　　　　 HNO₂ ＋ HCl → NOCl ＋H₂O　　　　　 (2)

由于(1)式的平衡常数比(2)式的约大300倍，即生成的NOBr量大得多，也就是在供试液中NO+的浓度大得多，从而加速了重氮化反应。     

亚硝酸钠法用时15min，其他4种方法分别用时3min,含量测定共计用时27min。

具游离芳伯氨基的药物可用本法直接测定。

具潜在芳伯氨基的药物，如芳香族硝基化合物（如无味氯霉素)经还原，也可用本法测定。

具潜在芳伯氨基的药物，如具酰胺基药物（对乙酰氨基酚等)经水解，也可用本法测定。

复习：

在一定温度下，可逆反应达到平衡时，生成物的浓度以反应方程式中该物质分子式前的系数为乘幂的乘积与反应物的浓度以反应方程式中该物质分子式前的系数为乘幂的乘积之比是一个常数，这个关系叫化学平衡定律，这个常数叫平衡常数。

基本内容

注解（进展、辅助

手段和时间分配)

酸度加大，反应向左进行，故可以防止偶氮氨基化合物的生成。若酸度过大，又可阻碍芳伯氨基的游离，反而影响重氮化反应速度。在太浓的盐酸中还可使亚硝酸分解。所以，加入盐酸的量一般按芳胺类药物与酸的摩尔比约为1:2.5～6。

3) 室温（10～30℃)条件下滴定：通常温度高，重氮化反应速度快；但温度太高，可使亚硝酸逸失，并可使重氮盐分解：

　　4)滴定管尖端插入液面下滴定：重氮化反应为分子反应，反应速度较慢，故滴定不宜过快。为了避免滴定过程中亚硝酸挥发和分解，滴定时将滴定管尖端插入液面下约2/3处，一次将大部分亚硝酸钠滴定液在搅拌条件下迅速加入，使其尽快反应。然后将滴定管尖端提出液面，用少量水淋洗尖端，再缓缓滴定。尤其是在近终点时，因尚未反应的芳伯氨基药物的浓度极稀，须在最后一滴加入后，搅拌1～5分钟，再确定终点是否真正到达。这样可以缩短滴定时间，也不影响结果。

　　3.指示终点的方法　有电位法、永停滴定法、外指示剂法和内指示剂法等。药品标准中多采用永停滴定法或外指示剂法指示终点。

1)永停滴定法： 中国药典规定用永停法指示亚硝酸钠滴定法的终点。电极应为铂－铂电极系统。用亚硝酸钠液滴定，终点前，溶液中无亚硝酸，线路无电流通过，电流计指针指零。终点时溶液中有微量亚硝酸存在，电极即起氧化还原反应，线路中遂有电流通过，此时电流计指针突然偏转，并不再回复，即为滴定终点。

2)外指示剂法：常用碘化钾-淀粉糊剂或指示剂，滴定到达终点时，稍过量的亚硝酸钠在酸性溶液中氧化碘化钾，析出的碘遇淀粉即显蓝色。

结合反应历程及课件动画图片加以分析，使学生更好理解。

要使学生了解可逆电对的三种情况。

外指示剂法的不足：

①混淆终点。

②增加误差。

基本内容

注解（进展、辅助

手段和时间分配)

(二) 非水溶液滴定法

盐酸丁卡因和盐酸利多卡因侧链烃胺的叔胺氮具有弱碱性，而盐酸布比卡因侧链哌啶环上的叔胺氮也具有弱碱性，均可采用非水溶液滴定法测定含量。盐酸丁卡因和盐酸利多卡因测定时，将供试品溶解在冰醋酸中，以结晶紫为指示剂，用高氯酸液(0.1mol/L)滴定至终点；而盐酸布比卡因测定时，则以萘酚苯甲醇为指示剂。由于药物均为盐酸盐，用高氯酸滴定时有氢卤酸生成，故在滴定前加入醋酸汞溶液，使成为氯化高汞，以除去氢卤酸的干扰。

在滴定盐酸丁卡因时，因其在冰醋酸中显较弱的碱性，因此加入适量醋酐。因醋酐解离生成的醋酐合乙酰氧离子比醋酸合质子的酸性还强，有利于丁卡因碱性的增强，使滴定突跃敏锐。滴定至终点时，溶液显蓝色。

盐酸利多卡因测定时无需加入醋酐，滴定至终点时，溶液显绿色；而盐酸布比卡因测定时是以萘酚苯甲醇为指示剂，滴定至终点时，溶液亦显绿色。

盐酸利多卡因非水溶液滴定法反应过程如下：

1.对乙酰氨基酚的测定　 

2.片剂溶出度测定

3.分光光度法测定人唾液中对乙酰基酚的含量

(四) 比色法

(五) 盐酸普鲁卡因胺的快速荧光测定　

(六) 高效液相色谱法

(七)体内药物分析

结合以往的学生试验，给同学简单讲解试验过程中应注意的事项。

请同学记住：

中国药典（2005年版)测定对乙酰氨基酚原料、片剂、注射液、栓剂及胶囊剂的含量方法：用百分吸收系数（)法。

问题讨论(5min)；

作业和习题布置(2min)；

归纳总结(3min)。

小 结

本节课主要讲授了①芳胺类药物的鉴别试验方法和含量测定的亚硝酸钠滴定法(掌握)；②芳胺类药物的特殊杂质检查和含量测定的非水滴定法和分光光度法(熟悉)；③芳胺类药物的基本结构与主要化学性质(了解)。

复习思考题

或

作 业 题

1、三氯化铁试剂可用于芳胺类某些药物的区别：具三氯化铁反应的是 A 利多卡因；B 醋氨苯砜； C 苯佐卡因； D 对乙酰氨基酚； E 普鲁卡因

2、亚硝酸钠滴定法在本类药物含量测定中的须注意的主要条件有哪些？

3、亚硝酸钠滴定法在本类药物含量测定中指示终点的方法？ChP（2005)亚硝酸钠滴定法测定对氨基水杨酸钠的含量时，指示滴定终点的方法为哪种

4、非水滴定法中加入醋酸汞的目的？

5、下列药物不能采用重氮化滴定法的是A 盐酸丁卡因 B 苯佐卡因C 贝诺酯

 D 利多卡因 E 普鲁卡因

6、盐酸异丙肾上腺素的检查项目是A. 有关物质B.二苯酮C.盐酸D.醛E.酮体

7、以下那种药物中应检查对氨基苯甲酸A. 盐酸普鲁卡因B. 盐酸普鲁卡因胺

C. 注射用盐酸普鲁卡因D. 盐酸普鲁卡因胺片E. 盐酸普鲁卡因注射液

8、芳氨类药物有哪些鉴别方法？

9、对乙酰氨基酚特殊杂质是什么，怎样检查？

10、芳氨类药物有哪些含量测定方法？

教 学 效 果

与 分 析

多媒体教学和板书相结合，并结合一定的实例，加深学生对知识点的认识和了解。特别是通过问题讨论，让大家对所学知识进行回顾、讨论，建立一个互动的教学氛围。效果较好。

基本内容

注解（进展、辅助

手段和时间分配)

一、结构与性质

(一) 基本结构与典型药物

本类药物为拟肾上腺素类药物，共性为具有苯乙胺的基本结构。其中肾上腺素、盐酸异丙肾上腺素和盐酸多巴胺分子结构中苯环的1,2位上都有2个邻位酚羟基，与儿茶酚类似，都属于儿茶酚胺类药物。本类药物的基本结构为：

 苯乙胺类典型药物

讲授结合多媒体教学

15min,其中结构介绍2min，典型药物介绍13min.

注意：

是结构中苯环的1,2位上都有2个邻位酚羟基，而非教材中所写的3,4位。此处根据典型药物结构向同学讲解清楚

通过教学课件向同学讲解并比较各典型药物的结构。

如：肾上腺素为：(R)-4-[2-(甲氨基)-1-羟基乙基]-1,2-苯二酚；

盐酸去氧肾上腺素为：

(R)-4-(2- 氨基-1- 羟基乙基 )-1，2-苯二酚重酒石酸盐一水合物

基本内容

注解（进展、辅助

手段和时间分配)

基本内容

注解（进展、辅助

手段和时间分配)

　  1.弱碱性　烃氨基侧链，其氮为仲胺氮，显弱碱性。其游离碱难溶于水，易溶于有机溶剂，其盐可溶于水。

2.酚羟基特性　可与重金属离子络合呈色，露置空气中或遇光、热易氧化，色渐变深，在碱性溶液中更易变色。　

3.光学活性　多数药物分子结构中具有手性碳原子，具有旋光性，可供分析用。

二、鉴别试验

(一) 与三氯化铁反应---酚羟基

肾上腺素和盐酸去氧肾上腺素等药物的分子结构中具有酚羟基，与Fe³⁺ 离子络合显色，加入碱性溶液，随即被高铁离子氧化而显紫色或紫红色。

 (二) 与甲醛－硫酸反应

肾上腺素和盐酸去氧肾上腺素等药物可与甲醛在硫酸中反应，形成具有醌式结构的有色化合物。

药典未采用此法，(略)

(三) 氧化反应---酚羟基

(四) 紫外特征吸收与红外吸收光谱

(五) 与亚硝基铁氰化钠反应（Rimini试验)

重酒石酸间羟胺分子中具有脂肪伯氨基，加水溶解后，加亚硝基铁氰化钠试液、丙酮数滴与碳酸氢钠少量，加热后即显红紫色。此为有脂肪族伯胺的专属反应。

试验中所用的丙酮必须不含甲醛。

(六)双缩脲反应

盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱分子结构中，芳环侧链具有氨基醇结构，可显双缩脲反应。如盐酸麻黄碱的鉴别[中国药典(2005)]：

【鉴别】  (1) 取本品约10mg，加水1ml 溶解后，加硫酸铜试液2 滴与20％氢氧化钠溶液1ml ，即显蓝紫色；加乙醚1ml ，振摇后，放置，乙醚层即显紫红色，水层变成蓝色。

(一) 酮体检查

在生产中由酮体氢化还原制得的药物，若氢化不完全，易引入酮体杂质，所以药典规定检查酮体。如肾上腺素、重酒石酸去甲肾上腺素、盐酸去氧肾上腺素、盐酸异丙肾上腺素和盐酸甲氧明等。

如：盐酸甲氧明：【检查】  酮胺  取本品，加水制成每1ml 中含1.5mg 的溶液，照分光光度法（附录Ⅳ A)，在347nm 的波长处测定，吸收度不得过0.06。

(二) 有关物质检查

采用薄层色谱法，如沙丁胺醇的检查：

8min

举例介绍

化学性质是下面所进行的鉴别、检查和含量测定的依据。

15min，结合药典、教学课件讲解

如中国药典(2005)：

肾上腺素、重酒石酸去甲肾上腺素、盐酸去氧肾上腺素的鉴别

结合药典、教学课件讲解。

如中国药典(2005年版)中重酒石酸去甲肾上腺素的鉴别

双缩脲：

在碱性溶液中，双缩 

脲能与Cu²⁺作用，形成紫色或紫红色络合物，这个反应叫双缩脲反应。

双缩脲试剂：0.1g/ml NaOH和0.01g/ml的CuSO4。

12min，酮体的来源和检查方法

基本内容

注解（进展、辅助

手段和时间分配)

(三) 盐酸苯乙双胍中有关双胍的检查

有关双胍  取本品1.00g ，置10ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，照纸色谱法（附录Ⅴ A)试验，精密吸取上述溶液0.2ml ，分别点于两张色谱滤纸条(7.5cm×50cm) 上，并以甲醇作空白点于另一色谱滤纸条，样点直径均为0.5 ～1www.med126.comcm ；照下行法，将上述色谱滤纸条同置展开室内，以醋酸乙酯－乙醇－水(6:3:1) 为展开剂，展开至前沿距下端约7cm 处，取出，晾干，用显色剂（取10％铁氰化钾溶液1ml ，加10％亚硝基铁氰化钠溶液与10％氢氧化钠溶液各1ml ，摇匀，放置15分钟，加水10ml与丙酮12ml，混匀)喷其中一张点样纸条（有关双胍显红色带，Rf值约为0.1 )，参照此色谱带，在另一张点样及空白纸条上，剪取其相应部分并向外延伸1cm ，并分剪成碎条，精密吸取甲醇各20ml分别进行萃取后，照分光光度法（附录Ⅳ A)，在232nm 的波长处测定吸收度，不得过0.48。   

四、含量测定

本类药物的原料多采用非水溶液滴定法和溴量法测定含量，其制剂的测定方法较多，有提取容量法、阴离子表面活性剂滴定法、比色法、紫外分光光度法和高效液相色谱法等。　

(一) 非水溶液滴定法

在列举的14型药物中，有11药物的原料药均采用非水溶液滴定法测定含量。常用的测定条件为：冰醋酸为溶剂，加入醋酸汞试液以消除氢卤酸的干扰，并用结晶紫指示液指示终点。仅盐酸甲氧明测定中以萘酚苯甲醇指示终点；盐酸苯乙双胍和盐酸克仑特罗的测定采用电位滴定法。如碱性较弱，终点不明显可加入醋酐，提高其碱性，使终点突跃明显。其测定的主要条件详见表 7－7。

1.重酒石酸去甲肾上腺素的测定　取本品0.2g，精密称定，加冰醋酸10ml，振摇溶解后(必要时微温)，加结晶紫指示剂1滴，用高氯酸滴定液（0.1mol/L)滴定，至溶液显蓝绿色，并将滴定结果用空白试验校正。每1ml的高氯酸滴定液（0.1mol/L)相当于31.93mg的C₈H₁₁NO₃.C₄H₄O₆。

由于重酒石酸在冰醋酸溶液中酸性较弱，不干扰高氯酸的滴定和结晶紫指示剂终点颜色的变化。故可以高氯酸直接滴定。

2.盐酸克仑特罗的测定　取本品约0.25g，精密称定，加冰醋酸20ml，微热使溶解，放冷，加醋酸汞试液5ml，照电位滴定法，用高氯酸滴定液（0.1mol/L)滴定，并将滴定结果用空白试验校正。每1ml的高氯酸滴定液(0.1mol/L)相当于31.37mg的C₁₂H₁₈C_l2N₂O·HCl。

注意展开剂的蒸气饱和程度对样品色谱行为的影响，尤其在使用混合溶剂时更为突出。

此处为纸色谱法的实例。

30min

结晶紫：

可由碱式色(紫色)变至蓝紫、蓝、蓝绿、绿、黄绿，最后转变为酸式色(黄色)。

萘酚苯甲醇:

碱式色：黄色

酸式色：绿色

基本内容

注解（进展、辅助

手段和时间分配)

*醋酸汞的作用--消除氢卤酸的干扰。

*为何用电位法指示终点？---由于盐酸克仑特罗的游离碱碱性较弱，终点突跃不明显。

3.硫酸沙丁胺醇的测定　取本品约0.4g，精密称定，加冰醋酸10ml，微热使溶解，放冷，加醋酐15ml和结晶紫指示液1滴用高氯酸滴定液（0.1mol/L)滴定，并将滴定结果用空白试验校正。每1ml的高氯酸滴定液（0.1mol/L)相当于57.67mg的（C₁₃H₂₁NO₃)₂ H₂SO₄ 。

有机碱的硫酸盐，因硫酸在滴定液中酸性很强，只能滴定至HSO₄^-。

  *为何在放冷的条件下加醋酐？

---防止氨基被乙酰化，乙酰化物碱性很弱，如为伯氨基的乙酰化物，以结晶紫为指示剂时不能被滴定，用电位滴定法尚可测定，但突跃很小，这样就会使滴定结果偏低。仲氨基的乙酰化物，以指示剂法和电位滴定法都不能被滴定。但在低温时可防止乙酰化，所以加冰醋酸溶解样品后，应在放冷的条件下再加醋酐。

 (二) 溴量法

重酒石酸间羟胺、盐酸去氧肾上腺素及其注射液均采用溴量法测定含量。其测定原理系药物分子中的苯酚结构，在酸性溶液中酚羟基的邻、对位活泼氢能与量的溴定量地发生溴代反应，再以碘量法测定剩余的溴，根据消耗的硫代硫酸钠滴定液的量，即可计算供试品的含量。如盐酸去氧肾上腺素：

请同学思考并回答：

(1) 醋酸汞的作用？

(2) 为何用电位法指示终点？

请同学讨论：

为何在放冷的条件下加醋酐？

碘量法一般常用三种：直接碘量法；剩余碘量法；置换碘量法。此处为置换碘量法。

溴液：

溴酸钾+溴化钾的混合溶液

至近终点时，加淀粉指示液，为什么？

基本内容

注解（进展、辅助

手段和时间分配)

【含量测定】  取本品约0.1g，精密称定，置碘瓶中，加水20ml使溶解，精密加溴液(0.1mol/L)50ml，再加盐酸5ml,立即密塞，放置15分钟并时时振摇，注意微开瓶塞，加碘化钾试液10ml ，立即密塞，振摇后，用硫代硫酸钠滴定液(0.1mol/L)滴定，至近终点时，加淀粉指示液，继续滴定至蓝色消失，并将滴定的结果用空白试验校正。每1ml溴滴定液(0.1mol/L)相当于3.395mg 的C₉H₁₃NO₂.HCl。

(三) 比色法

(四) 提取酸碱滴定法

本法是根据本类药物的盐酸盐或硫酸盐可溶于水，而药物本身为游离碱不溶于水，可以溶于有机溶剂的一般通性进行的。常用的测定方法是将供试品溶于水或矿酸溶液中，加入适量的碱性试剂使药物游离后，用适当的有机溶剂提取。然后将提取液蒸干，残渣中加中性乙醇溶解，用标准酸滴定液直接滴定；或在提取液中加过量的标准酸滴定液，蒸去有机溶剂后，再用标准碱滴定液回滴定。

如硫酸苯丙胺的含量测定：

(五) 肾上腺素的荧光分光光度法

(六) 高效液相色谱法

第三节　芳氧丙醇胺类药物

一、药物结构与主要理化性质

二、鉴别试验

三、盐酸卡替洛尔中有关物质的检查

本品中有关物质的检查，采用薄层色谱法的高低浓度对比法进行。

检查方法：

根据操作，对照溶液是由供试品稀释500倍制备而成，则对照溶液的浓度是供试品溶液浓度的0.2%。可见，盐酸卡替洛尔中有关物质的限量应控制在0.2%以内。

四、含量测定

(一)盐酸卡替洛尔原料药含量测定方法

 (二)盐酸卡替洛尔滴眼液含量测定方法

 (三)体内药物分析

10min,请同学注意：此处与教材有出入：

盐酸卡替洛尔中有关物质的限量应控制在0.2%以内。

问题讨论(5min)；

作业和习题布置(2min)；

归纳总结(3min)。

小 结

本次课主要讲授了苯乙胺类药物的结构与主要化学性质、鉴别试验、特殊杂质检查及含量测定方法。  

复习思考题

或

作 业 题

1、三氯化铁试剂可用于芳胺类某些药物的区别：具三氯化铁反应的是 A 利多卡因；B 醋氨苯砜； C 苯佐卡因； D 对乙酰氨基酚； E 普鲁卡因

2、亚硝酸钠滴定法在本类药物含量测定中的须注意的主要条件有哪些？

3、亚硝酸钠滴定法在本类药物含量测定中指示终点的方法？ChP（2005)亚硝酸钠滴定法测定对氨基水杨酸钠的含量时，指示滴定终点的方法为哪种

4、非水滴定法中加入醋酸汞的目的？

5、下列药物不能采用重氮化滴定法的是A 盐酸丁卡因 B 苯佐卡因C 贝诺酯

 D 利多卡因 E 普鲁卡因

6、盐酸异丙肾上腺素的检查项目是A. 有关物质B.二苯酮C.盐酸D.醛E.酮体

7、以下那种药物中应检查对氨基苯甲酸A. 盐酸普鲁卡因B. 盐酸普鲁卡因胺

C. 注射用盐酸普鲁卡因D. 盐酸普鲁卡因胺片E. 盐酸普鲁卡因注射液

教 学 效 果

与 分 析

多媒体教学和板书相结合，并结合一定的实例，加深学生对知识点的认识和了解。特别是通过问题讨论，让大家对所学知识进行回顾、讨论，建立一个互动的教学氛围，使同学们掌握本次课的教学内容。效果较好。