方法名称： |
七味解毒活血膏—儿茶素—HPLC-UV |
应用范围： |
本方法适用于七味解毒活血膏中儿茶素含量的测定 |
方法原理： |
本品经石油醚脱脂后，用甲醇超声提取，经液相色谱仪分离，在280nm测定，按外标法计算含量。 |
仪器设备及实验条件： |
仪器设备 Agilent HP-1100型高效液相色谱仪；VWD可变波长检测器。 色谱条件 色谱柱：Alltech Alltima C18 （4.6 ×250mm)； 流动相：乙腈- 0.2 %磷酸( 8∶92 )；检测波长：280nm；流速：1.0ml/ min； 柱温：35℃。 |
试样制备： |
对照品溶液制备 精密称取儿茶素对照品(置五氧化二磷为干燥剂的干燥器中，减压干燥48h) 5.50mg，置10ml 量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得每1ml中含儿茶素0.55mg 的对照品贮备液；精密量取1ml，稀释至10ml，得每1ml 中含儿茶素55μg 的对照品溶液。 供试品溶液的制备 取本品4g，精密称定，加石油醚(30～60℃) 50ml，超声处理10min，使全部溶散，放置1h，将上层石油醚液小心倾出，水层再用石油醚30ml洗涤1次，水层置水浴上挥尽石油醚，放冷，精密加入甲醇20ml，称定重量，超声处理5min 使溶散，放置1h，用甲醇补足减失的重量，摇匀，离心(3 000r/ min,10min)，取上清液，即得供试品溶液。 |
操作步骤： |
分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μl，注入液相色谱仪测定，按上述色谱条件测定峰面积，以外标法计算儿茶素的含量。 |
附件： |
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备注： |
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参考文献： |
耿家玲，孟芹， 姚青等. HPLC法测定七味解毒活血膏中儿茶素的含量. 云南中医学院学报.2005，28（1)：16～17 |
