2017年执业中药师中药化学章节考点（3)
第二章 生物碱
第三节 提取与分离
一、总生物碱的提取
(一)脂溶性生物碱的提取
1.水或酸水提取法
常用0.1%～1%的盐酸或硫酸，采用浸渍法或渗漉法提取。
①阳离子树脂交换法
②萃取法
2.醇类溶剂提取法
提取方法可采用浸渍法、渗漉法、回流提取法和连续回流提取法。
3.亲脂性有机溶剂提取法
用亲脂性有机溶剂提取之前，必须将中药用碱水(石灰乳、碳酸钠溶液或稀氨水)湿润，使生物碱游离，再用亲脂性有机溶剂萃取。提取方法多采用浸渍法、回流提取法或连续回流提取法。
二、生物碱的分离
(一)初步分离
将总生物碱按碱性强弱、酚性有无及是否水溶性，初步分离为5个部分。
A型题：
含下列生物碱的中药酸水提取液，用氯仿萃取，可萃取出的生物碱是
A.苦参碱
B.氧化苦参碱
C.秋水仙碱
D.麻黄碱
E.山莨菪碱
『正确答案』C
(二)生物碱单体的分离
1.利用生物碱碱性的差异进行分离
采用pH梯度萃取法分离。
一种方法是将总碱溶于稀酸水中，逐步加碱液调节pH，使pH由低到高，每调节一次pH，用氯仿萃取数次，从而将碱性由弱到强的生物碱依次转溶于氯仿而得以分离。
另一种方法是将总生物碱溶于氯仿中，用pH由高到低的酸性缓冲液依次萃取，使生物碱按碱性由强至弱的顺序自总碱中逐一转溶至酸性缓冲液中;然后分别将各部分酸性缓冲液碱化，用氯伤萃取得到不同碱性的生物碱。
2.利用生物碱及其盐的溶解度差异进行分离
①苦参碱和氧化苦参碱
苦参碱的极性小于氧化苦参碱，前后能溶于乙醚，而后者难溶于乙醚
两者的基本结构相似，仅一个取代基团的差异，后者为酚羟基，前者为甲氧基，故后者的极性大于前者。汉防己乙素难溶于苯，而汉防己甲素可溶于冷苯医学全.在.线.提供. www.med126.com。
③麻黄碱和伪麻黄碱
两者为一对光学异构体，前者的草酸盐较后者的草酸盐在水中的溶解度小。将麻黄碱和伪麻黄碱溶于适量水中，加入一定量草酸，麻黄碱生成草酸盐即先从水溶液中析出。
B型题：
A.麻黄碱
B.番林鳖碱
C.奎宁
D.奎尼丁
E.金鸡尼丁
1.可利用其硫酸盐在水中的溶解度小进行分离
『正确答案』C
2.可利用其盐酸盐在水中的溶解度小进行分离
『正确答案』B
3.可利用其酒石酸盐在水中的溶解度小进行分离
『正确答案』E
4.可利用其氢碘酸盐在水中的溶解度小进行分离
『正确答案』D
5.可利用其草酸盐在水中的溶解度小进行分离
『正确答案』A
3.利用生物碱特殊官能团进行分离
常见的有酚羟基、羧基、内酯或内酰胺结构等官能团。可利用这些官能团进行分离。
4.利用色谱法进行分离
(1)吸附柱色谱：常用氧化铝和硅胶作吸附剂，以亲脂性有机溶剂为洗脱剂。
(2)分配柱色谱：以硅胶为支持剂，酸性缓冲液为固定相。
三、生物碱的色谱鉴别
(一)薄层色谱
1.吸附薄层色谱法
(1)吸附剂：硅胶、氧化铝
(2)展开剂
(3)显色观察
多数生物碱的簿层色谱需用政良碘化铋钾试剂喷洒，显示桔红色斑点。
(4)应用范围
硅胶和氧化铝薄层色谱适用于分离和检识脂性生物碱。
2.分配薄层色谱法
(1)支持剂：硅胶、纤维素。
(2)固定相
对于脂溶生物碱的分离，多以甲酰胺为固定相;水溶性生物碱或生物碱盐则以水作固定相。
(3)展开剂
分离脂溶性生物碱，应以亲脂性有机溶剂作展开剂。分离水溶性生物碱，则应以亲水性的溶剂作展开剂，如BAW系统[正丁醇-乙酸-水(4:1:5)，上层]。
(4)应用范围
以甲酰胺为固定相的薄层色谱，适于分离弱极性或中等极性的生物碱，以水为固定相的薄层色谱，适于分离水溶性的生物碱。
(二)纸色谱
1.固定相：① 水;② 甲酰胺;③ 酸性缓冲液。
2.展开剂：以水作固定相的纸色谱，宜用亲水性溶剂系统作展开剂，如BAW[正丁醇-乙酸-水(4:1:5)，上层];以甲酰胺和酸性缓冲液作固定相的纸色谱，多以亲脂性有机溶剂系统作展开剂。
3.显色剂
4.应用范围：纸色谱法多用于水溶性生物碱、生物碱盐和弱亲脂性生物碱的分离检识。
(三)高效液相色谱
(四)气相色谱
气相色谱主要适用于挥发性化合物的分析，如麻黄生物碱、烟碱等。
第四节 含生物碱的中药实例
一、苦参
(一)化学结构
苦参所含生物碱主要是苦参碱和氧化苦参碱。属于喹喏里西啶类衍生物。分子中均有2个氮原子，一个是叔胺氮，一个是酰胺氮。
(二)理化性质
1.碱性
苦参碱中所含生物均有两个氮原子。叔胺氮(N-1)，呈碱性;酰胺氮(N-16)，几乎不显碱性，只相当于一元碱。
2.溶解性
苦参碱的溶解性能比较特殊，不同于一般的叔胺碱，它既可溶于水，又能溶于氯仿、乙醚、苯、二硫化碳亲脂性溶剂。氧化苦参是苦参碱的氮-氧化物，具半极性配位键，其亲水性比苦参碱更强，易溶于水，难溶于乙醚。
(三)生物活性
消肿利尿、抗肿瘤、抗病原体、抗心律失常、正性肌力、抗缺氧、扩张血管、降血脂、抗柯萨奇病毒、调节免疫等作用。
二、麻黄
(一)麻黄生物大及其化学结构
麻黄碱、伪麻黄碱，甲基麻黄碱、甲基伪麻黄碱和去甲基麻黄碱、去甲基伪麻黄碱。
麻黄生物碱分于中的氮原于均在侧链上。麻黄碱和伪麻黄碱属仲胺衍生物，且互为立体异构体，它们的结构区别在于C-l的构型不同。
(二)麻黄生物碱的理化性质
1.性状
麻黄碱和伪麻黄碱的分子量较小，为无色结晶。两者皆具有挥发性。
2.碱性
麻黄碱和伪麻黄碱为仲胺生物碱，碱性较强。伪麻黄碱的碱性稍强于麻黄碱。
3.溶解性
游离的麻黄碱可溶于水，但伪麻黄碱在水中的溶解度较麻黄碱小。麻黄碱和伪麻黄碱形成盐以后的溶解性能不完全相同，如草酸麻黄碱难溶于水，而草酸伪麻黄碱易溶于水;盐酸麻黄碱不溶于氯仿，而盐酸伪麻黄碱可溶于氯仿。
(三)麻黄生物碱的鉴别反应
麻黄碱和伪麻黄碱不能与大数生物碱沉淀试剂发生反应。
1.二硫化碳-硫酸铜反应 属于仲胺的麻黄碱和伪麻黄碱产生棕色沉淀。
2.铜络盐反应 麻黄碱和伪麻黄的水溶液加硫酸铜、氢氧化钠，溶液呈蓝紫色。
